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时隔2年之后，小白鼠史都华（迈克尔·J·福克斯配音）又出现在观众面前，现在的史都华不但拥有了自己的小汽车，还加入了学校的足球队，一幅意气风发的样子。唯一让他心烦的事，就是妈妈在生了一个小妹妹玛萨之后，不自觉地把爱和关注全都倾注到玛萨身上，而忽视了自己。一天，心烦意乱的史都华正开着自己的小汽车回家，巧遇到正在被猎鹰追捕的小鸽子玛格罗（梅兰妮·格里菲斯配音），在史都华的帮助下，玛格罗摆脱了猎鹰的追逐，一次惊心动魄的历险拉近了两个孤独心灵的距离，我们的史都华坠入了情网。

他是一个聪明的、热心的家伙——他是一只老鼠，一只颇有心计的老鼠，他的名字叫斯图亚特。斯图亚特在这个对他来说超级庞大的世界里，一心想寻找自己的家和归属的意义，当他被里特一家收养之后，他开始了一场和各种角色一起的冒险活动——包括他的宿敌家：猫斯纳贝尔。